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2015年新色谱柱及配件大盘点之亲水作用色谱法
发布:resheng   时间:2015/12/7 8:41:10   阅读:843 
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本文综述了匹兹堡展览会上介绍的上一年度新的液相色谱(LC)柱和配件。今年,这篇综述由前“创新高效液相色谱”和“观点验证”专栏的创始人Michael Swartz撰写。
 
由Ron Majors撰写的关于匹兹堡分析化学和应用光谱学学术报告会和展览会综述性文章的年刊已经发行了32年。这些综述首次出现在1983年5月的“Column Watch”专栏的第二部分。每年,Majors都会总结在匹兹堡会议上介绍的新的色谱柱和样品制备仪器,同时也会阐述这些技术发展的重要性并分析其未来的发展趋势。多年来,该综述文章已经成为该领域最新进展的参考标准,我很荣幸地成为今年综述的客座作者。

杂志LCGC(液相气相色谱)决定在一些方面做出改变。本文将围绕2014年匹兹堡会议上介绍的各种色谱法,所涉及的分离柱和相关设备分别进行介绍,包括样品的制备以及气相色谱法(GC)的相关内容。

按照色谱柱类型和色谱类型进行划分,大致分为:传统的反相、核-壳、亲水作用色谱(HILIC)、离子交换、超临界流体色谱、生物分子和离子色谱法等,以及相关的设备。本专栏的目的是总结过去一年中大多数供应商推出的新品以及目前的发展趋势,为以应用领域为代表的研究提供更多的信息。本部分主要介绍亲水作用色谱法。
 
亲水作用色谱法亲水作用色谱长期被人们使用,但是HILIC这个名词仅仅是最近才被使用。分析物通常是极性化合物,如极性代谢物,碳水化合物或肽。

HILIC可以被看作正相色谱向水性流动相领域的延续。流动相是水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂。固定相是强亲水性的极性吸附剂,如硅胶键合相,极性聚合物填料或离子交换吸附剂。这些固定相的共同特点是它们和水的作用力很强,因此属于“亲水性”。HILIC模式使用的梯度和反相模式相反。初始条件包括高比例有机相,典型的浓度是95%有机相如乙腈,逐步降低到水相。因此,HILIC色谱又被称为反反相色谱。

今年的调查中出现了四种HILIC柱,它们的配体要么是多孔硅基(tpp),要么是SPPs,具有各种尺寸规格。实际上大多数HILIC柱是用于生物分子的分离,但此处我打破了这个分类方法,将它们总结如下表1。
 
1 HILIC
公司 产品名 固定相 粒径 柱规格 点评
Agilent Technologies AdvanceBio Glycan Mapping Proprietary glycan-specific 1.8 μm (TPP) 2.7 μm (SPP) 100 and 150 mm × 2.1 mm TPP 100-150 mm × 2.1-4.6 mm SPP 对于聚糖类化合物具有独特的选择性。出色的分辨率提高了定量的精确度和定性的准确性。非常适用于UHPLC和HPLC分析。
Supelco BIOshell Glycan Penta-hydroxyl 2.7 μm SPP 150 mm × 2.1-4.6 mm 对于聚糖类化合物的分离速度快,分辨率高,重复性好。
Shodex/Showa Denko America, Inc. HILICpak VG-50 4E Tertiary amino 5 μm 250 mm × 4.6 mm 用于糖类的分离,尤其是还原糖;pH适用范围2-13。
HILICpak VG-50 4D 150 mm × 4.6 mm

Shodex公司推出的HILICpak VG-50 4E和4D柱是用于还原糖和低聚糖的分离。叔胺基相的柱子可在pH 2-13之间运行。Agilent Technologies 公司推出了一个广泛的HILIC系列柱,既有TPPs又有SPPs,也包括各种粒径和尺寸规格。统称为AdvanceBio,旨在用于分离mAbs裂生出的氮聚糖及表征mAbs的糖基化。AdvanceBio柱可在HPLC和UHPLC两种色谱模式下运行,具有快速、高分辨率的优势,并不受仪器局限。可以通过选择填料颗粒的粒径或形态、以及柱子的尺寸规格,来优化其分析速度和分辨率。AdvanceBio柱的质量控制可以通过测定多糖样品控制其性能。Supelco公司也推出了一系列的SPP柱以用于多糖的分析。BIOshell Glycan 柱用于糖蛋白的分析,它具有独特的固定相,为一种高度极性配位体,即拥有五个羟基与硅基进行配位,形成了一种新颖的、专有的化学连接。

译自:chromatographyonline
来源:材料与测试
译者:兔子小光
 
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