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贝类中恐怖失忆毒素软骨藻酸的高效快速化学分析方法
发布:kittyll   时间:2015/11/5 16:42:49   阅读:624 
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1987年,加拿大有150多人因误食了被一种不知名的毒素污染了的贝类而导致了大规模的中毒事件,大多数中毒者的临床症状表现为胃肠疼痛、神志不清、痉挛、永久或短期失忆,个别病例出现死亡症状,因此这种不知名的毒素被称作记忆缺失性贝类毒素(ASP)。ASP的主要成分为软骨藻酸(DA),是由一些浮游藻类产生的类氨基酸物质。目前研究结果显示,有相当一部分滤食性海洋生物能够在其体内富集DA,并随食物链进入人体而备受关注。
 
目前常用的ASP的检测方法主要有小鼠生物检测法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱检测法、酶联免疫吸附法、毛细管电泳法和分子印迹法等。高效液相色谱法具有准确、稳定、灵敏度高的优点,是政府农业化学家协会和欧洲标准化委员会认可的分析贝类中DA的分析方法。与高效液相色谱相比,超高效液相色谱(UPLC)具有快速、高效、节省溶剂的优点,具有更广阔的应用前景。大连出入境检验检疫局的褚莹倩等研究人员利用UPLC建立并优化了贝类中ASP的快速高效检测方法。
 

样品经甲醇(1+1)溶液提取,采用Oasis MAX固相萃取柱对提取液进行净化后,在Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱上分离,以乙腈0.1%(体积分数)三氟乙酸(13+87)混合液为流动相进行洗脱,紫外检测波长为242 nm。
 
配质量浓度为0.1、1.0、2.5、5.0、10.0 mg/L的DA的标准溶液,用UPLC进行分析。结果表明DA的质量浓度在0.1~10.0 mg/L范围内时与其峰面积呈线性关系,相关系数为0.9985。方法的测定下限(10S/N)为0.2 mg/kg。
 
称取阴性试样5.000 g,分别添加0.2,0.3,0.4 mg/kg DA标准溶液,按试验方法处理后进行测定,加标回收率在76.8%~91.2%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在11%~16%之间
 
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节选自《理化检验-化学分册》第51卷第10期
 
本文作者:褚莹倩,硕士研究生,研究方向为生物毒素。
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